一种高效分离小鼠精原干细胞的方法

本发明公开了一种高效分离小鼠精原干细胞的方法，包括如下步骤：步骤一，收集小鼠睾丸，采用两步酶消化法制备睾丸细胞悬液；步骤二，将睾丸细胞悬液按照一定密度接种到孔板中，加入精原干细胞培养液进行体外培养；步骤三，去掉培养液，用胰蛋白酶消化培养不同时间的睾丸细胞，从睾丸细胞中用免疫磁珠法分选精原干细胞；步骤四，将分选的精原干细胞接种到STO滋养层上，加入精原干细胞培养液，对精原干细胞进行原代和传代培养。本发明通过分离→培养→再分离→再培养的方法，建立了小鼠精原干细胞系，该发明可以达到体外高效富集精原干细胞的目的，且经济易行。从而为珍稀动物品种的保护及男性不育的治疗提供一个方向。

1.买家委托交易经纪人服务，与交易经纪人签定《交易合同》，并按合同约定付款方式支付款项；

2.交易经纪人确定收到合同约定款项后，与卖家签定《交易合同》，支付合同约定款项；

3.卖家确定收到合同约定款项后，向交易经纪人交付《专利转让委托书》、《转让协议》、《解聘书》各一式两份；

4.交易经纪人确认材料无误后，若买方自行办理转让，则交易经纪人将《专利证书》及转让材料原价交付买方，至此合同完成；

5.若买家委托交易经纪人代办转让手续，交易经纪人确认材料无误后提交办理国家手续，国家专利局1个月左右下发《专利转让手续合格通知书》， 交易经纪人确认转让成功后支付合同约定剩余款项给卖方，并交付《专利证书》、《专利转让手续合格通知书》原件给买方，至此专利转让合同完成。

1.买家交易款项将暂保管于九知网担保账户，九知网全程资金代管，保障买卖双方资金安全。

2.选择委托经纪人服务，均由交易经纪人验证交易品和买卖双方身份信息真实有效性。

3.九知网专属律师事务所将对委托交易全程监督，确保所有交易合同及相关文件合法有效。

4.选择委托经纪人服务，并由九知网向卖家代付定金；待国家知识产权局下发手续合格通知书、并经九知网核实后，支付卖家尾款。

5.选择委托经纪人服务，将由交易经纪人代办国家手续，客户随时可查进度。